The anillin-related Int1 protein and the Sep7 septin collaborate to maintain cellular ploidy in Candida albicans

Abstract

La variación de la ploidía celular es una característica común de los aislamientos clínicos de Candida albicans que son resistentes al medicamento antimicótico fluconazol. Aquí, informamos que la proteína relacionada con la anilina Int1 interactúa con los septanos para acoplar la citoquinesis con la segregación nuclear. La pérdida de Int1 resulta en un rápido desmontaje de los anillos septinales duplicados del cuello del brote al comienzo de la contracción del anillo de actomiosina. Sorprendentemente, esto no tiene mayor impacto en la citoquinesis y la formación del septo. Sin embargo, el Int1 interactúa genéticamente con el septina Sep7, manteniendo la barrera de difusión en el cuello de la yema y garantizando una fiel segregación nuclear. De hecho, las células mutantes, en contraste con int1ΔΔ cdc10ΔΔ, sufren una activación prematura de la salida mitótica antes de la alineación del huso mitótico con el eje de la división, produciendo grandes células multinucleadas. Algunas de estas células multinucleadas surgen de trimeras similares a las que se observan al exponerse al fluconazol. Finalmente, los defectos en la segregación nuclear podrían deberse en parte a la incapacidad de mantener el activador de la salida mitótica Lte1 en la corteza de la célula hija. Estos resultados sugieren que el Int1 y el Sep7 juegan un papel en el mantenimiento de la estabilidad del genoma al actuar como una barrera de difusión para Lte1.

Variation in cell ploidy is a common feature of Candida albicans clinical isolates that are resistant to the antifungal drug fluconazole. Here, we report that the anillin-related protein Int1 interacts with septins for coupling cytokinesis with nuclear segregation. Loss of Int1 results in a rapid disassembly of duplicated septin rings from the bud neck at the onset of actomyosin ring contraction. Strikingly, this has no major impact on cytokinesis and septum formation. However, Int1 genetically interacts with the Sep7 septin, maintaining the diffusion barrier at the bud neck and guarantying a faithful nuclear segregation. Indeed, int1ΔΔ sep7ΔΔ mutant cells, in contrast to int1ΔΔ cdc10ΔΔ, undergo a premature activation of mitotic exit prior to the alignment of the mitotic spindle with the division axis, producing large multinucleated cells. Some of these multinucleated cells arise from trimeras similar to those observed upon fluconazole exposure. Finally, the defects in nuclear segregation could be in part due to the inability to maintain the Lte1 mitotic exit activator at the cortex of the daughter cell. These results suggest that Int1 and Sep7 play a role in maintaining genome stability by acting as a diffusion barrier for Lte1.