Identificador persistente para citar o vincular este elemento: http://hdl.handle.net/10662/11836
Títulos: Regulación de la citotoxicidad inducida por oleuropeína en células humanas de osteosarcoma: papel de la vía apoptótica Bax/Bcl-2
Autores/as: Leal Hernández, Olga
Director/a: Morán García, José María
Palabras clave: Oleuropeína;Oleurepin;Osteosarcoma;Apoptosis
Fecha de publicación: 2020
Resumen: La dieta mediterránea es ampliamente consumida y aceptada en nuestra sociedad. La oleuropeína, uno de los principales componentes del aceite de oliva, ha sido objeto de estudio en numerosos trabajos, destacando aquellos que tratan sobre sus propiedades anticancerígenas. La agresividad de esta patología y el crecimiento descontrolado que produce en las células hace que exista un gran interés biomédico que permita buscar nuevas estrategias para abordar esta enfermedad. En la primera parte de este estudio, se evaluó la actividad antiproliferativa de la oleuropeína en dos líneas celulares humanas de osteosarcoma (MG-63 y Saos-2). El análisis estadístico de IC50 por el método de regresión Probit sugirió que la oleuropeína tuvo efectos tóxicos similares en ambas líneas celulares (rango de IC50 247.4-475.0 μM en MG-63 y 359.9-798.7 μM en Saos-2). Posteriormente, se estudió la vía apoptótica Bax/Bcl-2 en las células humanas de osteosarcoma MG-63 carentes de p-53, tras ser expuestas a la oleuropeína. La actividad de caspasa-3 se midió mediante ensayo colorimétrico. Además, la expresión del mRNA de Bax, Bcl-2 y p-53 fue determinada por PCR en tiempo real después de 24 horas de exposición. Tanto la relación entre la expresión del mRNA de Bax/Bcl-2 como la actividad de la caspasa-3 aumentaron en las células expuestas a la oleuropeína en comparación con las del control no expuesto (P<0.05). Como se esperaba, no se detectó ningún mRNA de p-53 en las células MG-63. Nuestros resultados sugieren que la oleuropeína induce muerte compatible con apoptosis independiente de p-53 en células de osteosarcoma humano MG-63.
Mediterranean diet is widely consumed and accepted in our society. Oleuropein, one of the main components of olive oil, has been investigated in numerous studies, especially those dealing with its anti-cancer properties. The severity of this pathology and the uncontrolled growth it produces in the cells lead to a great biomedical interest in exploring new strategies to efficiently confront this disease. This study evaluated the antiproliferative activity of oleuropein in two human osteosarcoma cell lines (MG-63 and Saos-2). IC50 statistical analysis by Probit regression method showed that oleuropein had similar toxic effects on both cell lines (IC50 ranges from 247.4-475.0 μM for MG-63 cells and from 359.9-798.7 μM for Saos-2 cells). Thereafter, the p-53-null MG-63 human osteosarcoma cells were exposed to oleuropein and the Bax/Bcl-2 apoptotic pathway was investigated. Caspase-3 activity was determined by a colorimetric assay. Furthermore, Bax, Bcl-2 and p-53 mRNA expression was assessed by real-time PCR following 24 hours of exposure. Both the ratio of Bax/Bcl-2 mRNA expression and caspase-3 activity were enhanced in cells exposed to oleuropein when compared to unexposed control cells (P < 0.05). Predictably, no p-53 mRNA expression was observed in MG-63 cells. These results show that oleuropein induces a p-53-independent apoptosis-like mechanism in human MG-63 osteosarcoma cells.
Descripción: Tesis por compendio de publicaciones
URI: http://hdl.handle.net/10662/11836
Colección:Tesis doctorales

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