Análisis de la expresión de checkpoints, receptores activadores y proteínas citotóxicas intracelulars en células Natural Killer, células NKT-like y linfocitos T en pacientes de Leucemia Mieloide Aguda

Abstract

La leucemia mieloide aguda (LMA) es una neoplasia mieloide maligna caracterizada por un mal pronóstico y una baja supervivencia. Diferentes alteraciones descritas en las células NK y T limitan el control de los blastos. El objetivo del presente estudio fue analizar la expresión de checkpoints, receptores activadores y proteínas citotóxicas intracelulares en las células NK, NKT-like (CD3+CD56+) y T (CD3+CD56−) de los pacientes de LMA. El análisis se realizó mediante citometría de flujo en 36 pacientes recién diagnosticados de LMA. Los resultados mostraron un aumento de la coexpresión de PD-1/TIM3 y TIGIT/TACTILE en las células NK y T de los pacientes de LMA que se asoció a una peor supervivencia. Igualmente, una menor mayor expresión de TIGIT y TACTILE en las células T se asoció a un peor pronóstico. Se observó un incremento de la expresión de NKG2A. En los resultados también se observó un descenso en la expresión de DNAM-1, CD6 y NKp80 en las células NK, NKT-like y T de los pacientes de LMA al compararlo con los controles sanos. Además, las células NK presentaron una menor expresión de CD16 y la coexpresion de NKp46 y NKp30 se encontró disminuida. La concentración intracelular de Granulisina y Granzima B en las células NK y NKT-like fue menor en los pacientes de LMA. En conclusión, la expresión de checkpoints, la pérdida de expresión de receptores activadores y el descenso de la concentración intracelular de proteínas citotóxicas pueden contribuir al escape de los blastos leucémicos en los pacientes de LMA.

Acute myeloid leukemia (AML) is a hematopoietic malignancy characterized by a poor prognosis and poor overall survival. Several alterations have been described in T and NK cells in AML patients that limit tumor control by the immune system. The aim of this work was to analyze the expression of checkpoints, activating receptors and intracellular cytotoxic proteins in NK cells, NKT-like (CD3+CD56+) and T cells (CD3+CD56−) from AML patients. We have studied 36 AML patients at the time of diagnosis. The analysis was performed by flow cytometry. Our results showed an increase in the co-expression of PD-1/TIM3 as well as TIGIT/TACTILE in NK and T cells from AML patients when compared with healthy controls that was associated with lower survival. High percentages of TIGIT+TACTILE+ T cells were also associated with lower survival. The expression of NKG2A in NK cells was also increased in AML patients. We found a reduced expression of DNAM-1, CD6 and NKp80 in NK, NKT-like and T cells from AML patients when compared with healthy controls. In addition, NK cells from AML patients showed a lower expression of CD16 and the percentage of cells co-expressing NKp46 and NKp30 was also reduced. The intracellular concentration of Granulysin and Granzyme B decreased in the NK and NKT-like cells from AML patients. In conclusion, the increased expression of several checkpoints, the downregulation of activating receptors as well as the decrease of intracellular cytotoxic proteins in NK cells and T cells from AML patients may contribute to tumor escape.