Development of a real-time SYBR Green PCR assay for the rapid detection of Dermatophilus congolensis

Abstract

Métodos como la PCR en tiempo real (RT) no han servido para la detección y el diagnóstico rápidos de la infección por infección por Dermatophilus (D.) congolensis. En el presente estudio se evaluó un ensayo de RT-PCR SYBR Green específico de D. congolensis. El límite de detección del ensayo RT-PCR fue de 1 pg de ADN por reacción de PCR. No hubo reacción cruzada con ácidos nucleicos extraídos de Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium tuberculosis, Staphylococcus aureus o Austwickia chelonae. Por último, se hizo el ensayo RT-PCR para evaluar muestras clínicas recogidas de animales infectados naturalmente por D. congolensis. Los resultados demostraron que este ensayo es un método rápido y fiable para diagnóstico de la dermatofilosis.

Methods such as real time (RT)-PCR have not been developed for the rapid detection and diagnosis of Dermatophilus (D.) congolensis infection. In the present study, a D. congolensis-specific SYBR Green RT-PCR assay was evaluated. The detection limit of the RT-PCR assay was 1 pg of DNA per PCR reaction. No cross-reaction with nucleic acids extracted from Pseudomonas aeruginosa, Mycobacterium tuberculosis, Staphylococcus aureus, or Austwickia chelonae was observed. Finally, the RT-PCR assay was used to evaluate clinical samples collected from naturally infected animals with D. congolensis. The results showed that this assay is a fast and reliable method for diagnosing dermatophilosis.