Method for malaria diagnosis based on extractions of samples using non-invasive techniques: an opportunity for the nursing clinical practice

Abstract

Malaria has been for millennia one of the best known and most destructive diseases affecting humans. Its high impact has aroused great interest for the development of new effective and reliable diagnostic techniques. Recently it has been recently published that hairs from mammal hosts are able to capture, hold and finally remove foreign DNA sequences of Leishmania parasites. The aim of this study was to check if Plasmodium falciparum (P. falciparum) DNA remains stable in blood samples deposited in Whatman paper after suffering different transport and storage conditions, and to compare the sensitivity of these results with those offered by thick a smear and Rapid Diagnostic Test, and besides to examine whether P. falciparum DNA would be detected and quantified by Real time quantitative PCR (qPCR) from hairs of people with different types of malaria. P. falciparum Histidine Repeat Protein II (pHRP-II) antigen detection and P. falciparum DNA were detected in 18 of 19 dry blood samples adhered to Whatman paper (94.74%), besides, Plasmodium DNA was also detected in seven out of 19 hair samples analyzed (36.84%), remaining stable until analysis for several months under the exposure to different environmental conditions. Although the sensitivity of PCR for the diagnosis of malaria in hair samples is not as high as blood analysis, the study of Plasmodium DNA presence in blood and hair could constitute a complementary tool with numerous advantages in sample collection, transport and storage. We suggest that the method could be also applied to medical, forensic and paleo-parasitological diagnosis, not only for malaria but also for searching many other pathogens in hair samples.

La malaria ha sido durante milenios una de las enfermedades más conocidas y destructivas que afectan al ser humano. Su alto impacto ha despertado gran interés por el desarrollo de nuevas técnicas de diagnóstico eficaces y fiables. Recientemente se ha publicado que los pelos de mamíferos huéspedes son capaces de capturar, retener y finalmente eliminar secuencias de ADN extrañas de los parásitos Leishmania. El objetivo de este estudio fue comprobar si el ADN de Plasmodium falciparum (P. falciparum) permanece estable en muestras de sangre depositadas en papel Whatman tras sufrir diferentes condiciones de transporte y almacenamiento, y comparar la sensibilidad de estos resultados con los ofrecidos por una extensión gruesa y Prueba de diagnóstico rápido, y además examinar si el ADN de P. falciparum sería detectado y cuantificado mediante PCR cuantitativa en tiempo real (qPCR) a partir de pelos de personas con diferentes tipos de malaria. La detección de antígeno de P. falciparum Histidina Repetición Proteína II (pHRP-II) y ADN de P. falciparum se detectó en 18 de 19 muestras de sangre seca adheridas a papel Whatman (94,74%), además, también se detectó ADN de Plasmodium en siete de 19 cabellos. muestras analizadas (36,84%), permaneciendo estables hasta el análisis durante varios meses bajo la exposición a diferentes condiciones ambientales. Aunque la sensibilidad de la PCR para el diagnóstico de malaria en muestras de cabello no es tan alta como la del análisis de sangre, el estudio de la presencia de ADN de Plasmodium en sangre y cabello podría constituir una herramienta complementaria con numerosas ventajas en la recogida, transporte y almacenamiento de muestras. Sugerimos que el método también podría aplicarse al diagnóstico médico, forense y paleoparasitológico, no sólo de la malaria sino también para la búsqueda de muchos otros patógenos en muestras de cabello.