Does the microbial flora in the ejaculate affect the freezeability of stallion sperm?

Abstract

In an attempt to evaluate the possible relationship between the microbial flora in the stallion ejaculate and its ability to freeze, three ejaculates from five stallions were frozen using a standard protocol. Before freezing, an aliquot was removed for bacteriological analysis. Bacterial growth was observed in all the ejaculates studied. The isolated microorganisms were: Staphylococcus spp. and Micrococcus spp. (in all the stallions), b-haemolytic Streptococcus (in stallions 3 and 4), Corynebacterium spp. (in stallions 1, 3–5), Rhodococcus spp. (in stallion number 2), Pseudomonas spp. (in stallion number 1) and Klebsiella spp. (in stallions 1, 3 and 5). The presence and richness of Klebsiella and b-haemolytic Streptococcus in the ejaculate were related to two sperm variables post-thaw, namely the proportion of dead spermatozoa (ethidium+ cells; r = 0.55, p < 0.05) and the amplitude of lateral displacement of the sperm head (ALH, lm; r = )0.56, p < 0.05), respectively. The degree of growth of Corynebacterium spp. in the ejaculate was positively correlated with the percentage of spermatozoa showing high caspase activity post-thaw (r = 0.62, p < 0.05). The presence and number of colonies of b-haemolytic Streptococcus were negatively correlated (r = )0.55, p < 0.05) with low sperm caspase activity. It is concluded that the microbial flora of the equine ejaculate may be responsible for some of the sublethal damage experimented by the spermatozoa during cryopreservation.

En un intento de evaluar la posible relación entre la flora microbiana del eyaculado del semental y su capacidad de congelación, se congelaron tres eyaculados de cinco sementales siguiendo un protocolo estándar. Antes de la congelación, se extrajo una alícuota para el análisis bacteriológico. Se observó crecimiento bacteriano en todos los eyaculados estudiados. Los microorganismos aislados fueron: Staphylococcus spp. y Micrococcus spp. (en todos los sementales), Streptococcus b-hemolítico (en los sementales 3 y 4), Corynebacterium spp. (en los sementales 1, 3-5), Rhodococcus spp. (en el semental número 2), Pseudomonas spp. (en el semental número 1) y Klebsiella spp. (en los sementales 1, 3 y 5). La presencia y riqueza de Klebsiella y Streptococcus b-hemolítico en el eyaculado se relacionaron con dos variables espermáticas postdescongelación, a saber, la proporción de espermatozoides muertos (células etidio+; r = 0,55, p < 0,05) y la amplitud del desplazamiento lateral de la cabeza del espermatozoide (ALH, lm; r = )0,56, p < 0,05), respectivamente. El grado de crecimiento de Corynebacterium spp. en el eyaculado se correlacionó positivamente con el porcentaje de espermatozoides que mostraban una elevada actividad de caspasas tras la descongelación (r = 0,62, p < 0,05). La presencia y el número de colonias de Streptococcus b-hemolítico se correlacionaron negativamente (r = )0,55, p < 0,05) con una baja actividad caspasa espermática. Se concluye que la flora microbiana del eyaculado equino puede ser responsable de algunos de los daños subletales experimentados por los espermatozoides durante la crioconservación.