Identificación, regulación y estudio funcional de la proteína quinasa N-terminal de c-Jun (JNK) en espermatozoides de mamíferos

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Identificación, regulación y estudio funcional de la proteína quinasa N-terminal de c-Jun (JNK) en espermatozoides de mamíferos

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Título: Identificación, regulación y estudio funcional de la proteína quinasa N-terminal de c-Jun (JNK) en espermatozoides de mamíferos
Autor: Miró Mirán, Álvaro
Resumen: En este trabajo de investigación demostramos por primera vez la presencia y la localización subcelular de la quinasa N-terminal de c-Jun (JNK), en lisados de espermatozoides de mamíferos, incluida la especie humana. Mediante la utilización de anticuerpos específicos, hemos estudiado la regulación de la actividad de esta quinasa en los espermatozoides mantenidos tanto en situaciones de estrés celular, como frente a estímulos fisiológicos que están relacionados con los cambios de tipo capacitante y la reacción acrosómica. Además, hemos valorado la participación de esta quinasa en diversas funciones de los espermatozoides maduros eyaculados de caballo. También se han estudiado los cambios producidos en la actividad de JNK cuando los espermatozoides son sometidos a procesos biotecnológicos, como el almacenamiento en refrigeración (5º, hasta 5 días) y la criopreservación, relacionando la JNK con los cambios deletéreos que se producen en esos procesos. Hemos estudiado también la implicación de JNK en el mantenimiento de la supervivencia o la muerte celular, así como su participación en los mecanismos moleculares que regulan esos procesos en los espermatozoides. Por último, hemos evaluado los cambios en la fosforilación de JNK en espermatozoides humanos procedentes de donantes fumadores y no fumadores, correlacionando la actividad de JNK con la viabilidad espermática.In this research work we have demonstrated for the first time the presence and subcellular localization of the N-terminal kinase of c-Jun (JNK) in lysates of mammalian spermatozoa, including humans. By using specific antibodies, we have studied the regulation of JNK activity in stallion sperm when are subjected to external stresses as well as under physiological conditions which are related to capacitation and acrosome reaction. In addition, we have evaluated the involvement of this kinase in various physiological functions of the ejaculated stallion spermatozoa. We have also studied the changes in the activity of JNK when sperm are submitted to biotechnology processes, such as refrigeration (5 ºC, up to 5 days) and cryopreservation, linking JNK with the deleterious changes that occur in the spermatozoa during these processes. We have also studied the involvement of JNK in cell survival or cell death in sperm and the involvement of this kinase in the molecular mechanisms that regulate these processes in sperm. Finally, we have evaluated the changes in the phosphorylation of JNK in human sperm from smokers and nonsmokers donors, correlating the JNK activity with sperm viability.
URI: http://hdl.handle.net/10662/521
Fecha: 2013-06-17


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