Análisis de activación de p-ERK mediado por FGF en fibroblastos de pacientes con Mucopolisacaridosis tipo VI (MPS VI)

Abstract

La mucopolisacaridosis tipo VI (MPS VI), también conocida como síndrome de Maroteaux-Lamy, es una enfermedad de almacenamiento lisosomal resultante de la deficiencia o ausencia de Arilsulfatasa B. Los síntomas característicos incluyen afectación esquelética, facies tosca, cardiopatía y compresión de la médula espinal cervical, que van, desde formas lentas hasta formas rápidamente progresivas. A nivel molecular, esta deficiencia conduce a la acumulación patológica de dermatán sulfato, que altera la vía FGF (factor de crecimiento de fibroblastos), que se encuentra en la membrana celular o matriz extracelular, actuando como co-receptor y activándola. En este trabajo fin de grado se recogen los estudios realizados con ERK, centrándonos en su forma activa, p-ERK (su forma fosforilada) en la ruta de señalización de FGF que se encuentra alterada por el exceso de dermatán sulfato en pacientes con MPS VI. Para ello, se analizará los niveles de las formas fosforiladas y no fosforiladas de la proteína ERK en cultivos de fibroblastos inmortalizados de pacientes con MPS VI y pacientes control tratados con FGF a diferentes tiempos. Además, se medirán los niveles de expresión del gen FGFR1 en pacientes con MPS VI. Por último, basándonos en la utilización de surfeno, un antagonista de glucosaminoglicanos, que inhibe su acción, se observará la variación de los niveles de p-ERK y ERK en cultivo de fibroblastos de pacientes con MPS y se comparará con los resultados obtenidos en células de pacientes con MPS VI sin tratar.

Mucopolysaccharidosis type VI (MPS VI), also known as Maroteaux-Lamy syndrome, is a lysosomal storage disease resulting from the deficiency or absence of Arylsulfatase B. Characteristic symptoms include skeletal involvement, coarse facies, heart disease, and cord compression. cervical spinal cord, ranging from slow to rapidly progressive forms. At the molecular level, this deficiency leads to the pathological accumulation of dermatan sulfate, which alters the FGF (fibroblast growth factor) pathway, which is found in the cell membrane or extracellular matrix, acting as a co-receptor and activating it. In this final degree project, the studies carried out with ERK are collected, focusing on its active form, p-ERK (its phosphorylated form) in the FGF signaling pathway that is altered by excess dermatan sulfate in patients with MPS VI. . To do this, the levels of the phosphorylated and non-phosphorylated forms of the ERK protein will be analyzed in cultures of immortalized fibroblasts from patients with MPS VI and control patients treated with FGF at different times. In addition, the expression levels of the FGFR1 gene will be measured in patients with MPS VI. Finally, based on the use of surfen, a glycosaminoglycan antagonist, which inhibits their action, the variation in p-ERK and ERK levels in cultured fibroblasts from MPS patients will be observed and compared with the results obtained in cells. of patients with untreated MPS VI.