Adenylyl Cyclase Type 8 Overexpression Impairs Phosphorylation-Dependent Orai1 Inactivation and Promotes Migration in MDA-MB-231 Breast Cancer Cells

Abstract

Orai1 desempeña un papel importante en la entrada capacitativa de Ca2+ en células de cáncer de mama triple negativo. Este canal se inactiva mediante diferentes mecanismos, incluyendo la fosforilación dependiente de proteína quinasa C (PKC) y proteína quinasa A (PKA) en los residuos Ser-27 y Ser-30 o Ser-34, respectivamente. Además, también se demostró que la adenil ciclasa tipo 8 activada por calcio y calmodulina (AC8) interactúa directamente con Orai1, mediando así una interacción dinámica entre las vías de señalización dependientes de calcio y de monofosfato de adenosina cíclico (cAMP). Utilizando diversas técnicas como Ca2+-imaging, microscopia confocal, western blotting, inmunoprecipitación ó el ensayo de cierre de herida, entre otras, en este estudio demostramos por primera vez que las líneas celulares de cáncer de mama MCF7 y MDA-MB-231 presentan una expresión aumentada de Orai1 y AC8 en comparación con la línea celular epitelial mamaria no tumoral MCF10A. Además, demostramos que, en las células tumorales, AC8 interactúa con la variante Orai1α de una manera que no está regulada por la fosforilación de Orai1, provocando un aumento en la entrada capacitativa de calcio necesaria para la proliferación y migración de las células tumorales.