Evaluación de la calidad embrionaria mediante un ensayo de unión a EGF y su utilidad en la mejora de los medios de cultivo

Abstract

El hecho de que los embriones obtenidos por fecundación in vitro carezcan del ambiente endocrino adecuado, es un factor determinante en la reducción de su potencial implantatorio y esto se refleja en los resultados obtenidos a partir de los ciclos de reproducción asistida, donde el origen de los embriones depende de un proceso de fecundación artificial. En este sentido, la sincronización que se produce en el momento de la implantación, es quizás uno de los momentos más relevantes del proceso. Sin embargo, y aunque la finalidad de los diferentes protocolos de estimulación ovárica, comparten el objetivo de preparar el ambiente endocrino del endometrio; ha sido recientemente demostrado que tan importante como la preparación del endometrio, es la activación del embrión en el momento y lugar adecuados. No obstante, la activación y competencia del embrión son factores que se escapan al control del equipo médico. Según hemos podido confirmar, la adición de 4OHE2 al medio de cultivo durante la última etapa de desarrollo preimplantacional, permite compensar algunas de las consecuencias derivadas del cultivo artificial a favor de un aumento en la calidad embrionaria. A la vista de estos resultados y de acuerdo con la ventaja que el 4OHE2 ha demostrado suponer sobre la capacitación embrionaria y las primeras fases del proceso de implantación, podemos concluir que el 4OHE2 es un buen candidato en vistas de mejorar los medios de cultivo embrionario.

Para profundizar en el conocimiento del papel que realizan ciertas moléculas en el proceso de implantación y comprobar su posible utilización en la mejora de este importante proceso, se establecieron los siguientes objetivos: 1. Analizar el patrón de expresión de los receptores para EGF (ErbB4) en los diferentes estadios de maduración del oocito, durante el proceso de fecundación y a lo largo del desarrollo embrionario, esto último tanto en embriones obtenidos por fecundación “In Vitro” (FIV) como en los obtenidos del útero. 2. Establecer diferencias en la capacidad de implantación entre embriones obtenidos por fecundación in vitro y los obtenidos directamente del ambiente uterino. 3. Establecer un método de valorar la capacidad de unión a EGF en vivo utilizando un derivado del este factor unido a fluoresceína (EGF488). 4. Determinar los efectos del factor de crecimiento epidérmico sobre el desarrollo preimplantacional y la capacidad de implantación. 5. Determinar los efectos del 4OHE2 sobre el desarrollo preimplantacional y la capacidad de implantación.

The fact that embryos obtained by in vitro fertilisation may lack the appropriate endocrine environment, is a determinant factor in the reduction of its implantation potential and this is reflected in the results obtained from the cycles of assisted reproduction, where the origin of the embryos depends on a process of artificial insemination. In this sense, the synchronization that occurs at the time of implantation, is perhaps one of the most relevant moments of the process. However, although the purpose of the different protocols of ovarian stimulation, share the goal of preparing the endocrine environment of the endometrium; it has recently been shown that as important as the preparation of the endometrium, is the activation of the embryo at the appropriate time and place. However, the activation and competition of the embryo are factors that are beyond the control of the medical team. As we have been able to confirm, the addition of 4OHE2 to the culture medium during the last stage of preimplantation development, allows you to compensate for some of the consequences arising from the artificial cultivation in favor of an increase in embryo quality. In view of these findings and in accordance with the advantage that the 4OHE2 has been shown to be on the training and the early stages of the implementation process, we can conclude that the 4OHE2 is a good candidate in view of improving embryo culture media.