Análisis de la respuesta IgG1 e IgG2 en perros con leishmaniosis

Abstract

La leishmaniosis es una enfermedad causada por parásitos protozoos intracelulares del género Leishmania que afecta a numerosas especies de mamíferos, incluido el ser humano. En los países del sur de Europa la enfermedad está producida por la especie viscerotropa Leishmania infantum, siendo el perro el principal reservorio de la misma. En la leishmaniosis canina los niveles elevados de anticuerpos IgG específicos se han asociado con trastornos fisiopatológicos y fases activas de la enfermedad, detectables mediante diversas técnicas inmunológicas. El objetivo de este trabajo ha sido el análisis de la respuesta inmune humoral de las subclases IgG1 e IgG2 en muestras sanguíneas de 33 perros pertenecientes a dos zonas endémicas de leishmaniosis e infectados con esta enfermedad, a fin de establecer posibles correlaciones entre los niveles de anticuerpos de ambas subclases, y entre éstos y los resultados de otras pruebas diagnósticas como IFI o qPCR, así como con el cuadro clínico de los animales analizados. Para ello, se extrajeron muestras sanguíneas de los 33 perros y se llevó a cabo la técnica diagnóstica inmunológica ELISA SLA para los anticuerpos IgG1 e IgG2. En los animales analizados la respuesta de anticuerpos predominante fue de la subclase IgG2, con una sensibilidad diagnóstica mucho más elevada que la subclase IgG1. La positividad a la subclase IgG1 se correlacionó con elevados títulos por IFI y con la presencia de kADN en médula ósea y ganglio linfático en el 100% de los casos. Según los resultados, pareció existir una relación directa entre la magnitud de la respuesta IgG2 y la carga de ADN parasitario en médula ósea. A valores más elevados del balance IgG1/IgG2, mayor fue el valor de densidad óptica para la subclase IgG1. Los valores más elevados, tanto de IgG1 como de IgG2, se correspondieron con títulos elevados de anticuerpos por IFI y con casos sintomáticos en el 100% de los perros analizados.

Leishmaniosis is a disease caused by intracellular protozoan parasites of the genus Leishmania that affects a large amount of mammal species, including the human being. In South European countries, the disease is produced by the viscerotropic species Leishmania infantum, being the dogs the main reservoir of the disease. In canine leishmaniosis the increased levels of specific IgG antibodies have been associated with pathophysiological disorders and active phases of the disease, detectable through diverse immunologic techniques. The objective of this study has been the analysis of the humoral immune response of IgG1 and IgG2 subclasses in blood samples of 33 naturally infected dogs belonging to two endemic zones of leishmaniosis. After this analysis, the possible correlations between the levels of antibodies of both subclasses, and between those and the results of other diagnostic tests (IFAT, qPCR), as well as with the clinical status of the analysed animals were established. For this purpose, blood samples from the 33 dogs were taken, and the immunologic diagnosing technique ELISA SLA was carried out to determine IgG1 and IgG2 antibody levels. The predominant antibody response detected was of the IgG2 subclass, with a much higher diagnostic sensitivity than IgG1 subclass. The presence of antibodies of IgG1 subclass was associated with IFAT elevated titres and the presence of kDNA in the bone marrow and the lymph node in 100% of the cases. According to the results, a direct relationship seemed to appear between the magnitude of the response of IgG2 and the amount of parasitic DNA in the bone marrow. The larger the values of IgG1/IgG2 ratio, the higher the optical density value was for subclass IgG1. The highest values, from both IgG1 and IgG2, corresponded to elevated titres of antibodies from IFAT and with symptomatic cases in 100% of the analysed dogs.