Análisis: Filter trap

Abstract

Para realizar el lisado celular o de tejido pueden usarse dos fracciones: soluble e insoluble. En las fracciones solubles, se alisan las muestras con el volumen que corresponda de NP40 0,5 x; se incuban 10-15 minutos en hielo; se centrifuga a 13.000 rpm entre 15-60 minutos; se recoge el sobrenadante en eppendorfs rotulados con la palabra “Soluble”. En las fracciones insolubles, los pasos son: resuspender el pellet con un volumen adecuado de SB1x; sonicar; calentar 10 minutos en el termobloque y dar un spin. Por último, mantener en el mismo eppendorf rotulado con el término “Insoluble”.

Two fractions can be used for cell or tissue lysate: soluble and insoluble. For soluble fractions, samples are lysed with an appropriate volume of NP40 0.5 x; incubated 10-15 minutes on ice; centrifuged at 13,000 rpm for 15-60 minutes; the supernatant is collected in eppendorfs labelled 'Soluble'. For insoluble fractions, the steps are: resuspend the pellet with an appropriate volume of SB1x; sonicate; heat for 10 minutes in the thermoblock and spin. Finally, keep in the same eppendorf labelled "Insoluble".