Nuevas técnicas de diagnóstico molecular en lesiones plantares por virus del papiloma humano

Abstract

El virus del papiloma humano (VPH) causa infección en piel y mucosas con diferentes entidades clínicas desde lesiones de progresión neoplásica hasta tumores benignos de piel cutánea, como el caso de las lesiones plantares, que cursan, entre otros signos y síntomas, con dolor e impotencia funcional. El diagnóstico de estas lesiones plantares, es empíricamente visual, sin embargo, pueden darse dificultades en el diagnóstico y que las pruebas complementarias disponibles sean escasas o no estén ampliamente implementadas. En este contexto surge la justificación de esta tesis doctoral, que tiene por objetivo realizar un estudio de las posibilidades diagnósticas para las lesiones plantares por VPH y explora las técnicas de detección de ADN viral mediante PCR multiplex convencional, así como la optimización y mejora con técnicas moleculares de amplificación isotérmica mediada por bucle para adaptar los métodos diagnósticos a la casuística particular de la práctica de la podología en España. Con estos objetivos y los resultados obtenidos, se demuestra que el diagnóstico visual puede llevar a un porcentaje alto de errores diagnósticos y que la literatura apoya la investigación en técnicas moleculares, por lo que la implementación del método multiplex permitió esclarecer este hecho, al tiempo que nos da a conocer la realidad de distribución de genotipos del virus. Estos datos permitieron un mejor ajuste de la técnica de amplificación isotérmica que exitosamente mostró una sensibilidad y rendimiento analítico óptimo. En conclusión, el diagnóstico complementario de lesiones plantares es necesario los métodos de detección molecular han mostrado ser robustos y sensibles.

Human papillomavirus (HPV) causes infection of the skin and mucous membranes with different clinical entities from lesions of neoplastic progression to benign skin tumors, such as plantar lesions, which present clinically, among other signs and symptoms, with pain and functional impotence. The diagnosis of these plantar lesions is empirically visual; however, there could be difficulties in the diagnosis and complementary tests available are scarce or not widely implemented. In this context the justification for this doctoral thesis arises, which aims to study the diagnostic possibilities for HPV plantar lesions and explores viral DNA detection techniques using conventional multiplex PCR, as well as seeks optimization and improvement with loop-mediated isothermal amplification molecular techniques to adapt these diagnostic methods to the reality of podiatric practice in Spain. With these objec`ves, the results obtained show that visual diagnosis can lead to a high percentage of misdiagnosis and that the literature supports research in molecular techniques, so the implementa`on of the multiplex method allowed to clarify this fact, while, at the same time, revealed the reality of the distribution of HPV genotypes. These results allowed a bejer adjustment of the isothermal amplification technique that successfully showed op`mal sensi`vity and analytical performance. In conclusion, the complementary diagnosis of plantar lesions is necessary and the molecular detection methods have shown to be robust and sensitive.