PGRMC1 inhibits progesterone-evoked proliferation and Ca2+ entry via STIM2 in MDA-MB-231 cells

Abstract

Se ha demostrado que el componente 1 de la membrana del receptor de progesterona (PGRMC1) regula algunos características del cáncer. La progesterona (P4) provoca cambios en el calcio intracelular (Ca2+) en las líneas celulares de cáncer de mama triple negativo líneas celulares de cáncer de mama (MDA-MB-231, MDA-MB-468 y BT-20) y en otras líneas celulares de cáncer de mama como las células luminales MCF7. La expresión de PGRMC1 es elevada en las células MDA-MB-231 y MCF7 en comparación con la línea celular no tumoral MCF10A, y el silenciamiento de PGRMC1 aumenta la movilización de Ca2+ provocada por P4. En este trabajo hemos descubierto una nueva vía de movilización de Ca2+ dependiente de P4 en células MDA-MB-231 MDA-MB-231 y otras células de cáncer de mama triple negativo, así como en células MCF7, en las que interviene la molécula de interacción estromal 2 (STIM), la proteína 1 del canal de calcio activado por la liberación de calcio (Orai1) y el canal 1 del potencial receptor transitorio (TRP). La molécula de interacción estromal 1 (STIM1) no estaba implicada en esta nueva vía de Ca2+, como se demostró utilizando siRNA STIM1. El silenciamiento de PGRMC1 redujo el efecto negativo de P4 sobre la proliferación y muerte celular en células MDA-MB-231. En consonancia con esta última observación, la acumulación nuclear del Factor Nuclear de las Células T Activadas 1 (NFAT1) debida a la incubación de P4 durante 48 h aumentó las células transfectadas con el ARNsi de horquilla pequeña contra PGRMC1 (shPGRMC1). Estos resultados evidencian la existencia de una nueva vía de entrada de Ca2+ provocada por P4 que está regulada por PGRMC1.

Progesterone receptor membrane component 1 (PGRMC1) has been shown to regulate some cancer hallmarks. Progesterone (P4) evokes intracellular calcium (Ca2+) changes in the triple-negative breast cancer cell lines (MDA-MB-231, MDA-MB-468, and BT-20) and in other breast cancer cell lines like the luminal MCF7 cells. PGRMC1 expression is elevated in MDA-MB-231 and MCF7 cells as compared to non-tumoral MCF10A cell line, and PGRMC1 silencing enhances P4-evoked Ca2+ mobilization. Here, we found a new P4-dependent Ca2+ mobilization pathway in MDA-MB-231 cells and other triple-negative breast cancer cells, as well as in MCF7 cells that involved Stromal interaction molecule 2 (STIM2), Calcium release-activated calcium channel protein 1 (Orai1), and Transient Receptor Potential Channel 1 (TRPC1). Stromal interaction molecule 1 (STIM1) was not involved in this novel Ca2+ pathway, as evidenced by using siRNA STIM1. PGRMC1 silencing reduced the negative eect of P4 on cell proliferation and cell death in MDA-MB-231 cells. In line with the latter observation, Nuclear Factor of Activated T-Cells 1 (NFAT1) nuclear accumulation due to P4 incubation for 48 h was enhanced in cells transfected with the small hairpin siRNA against PGRMC1 (shPGRMC1). These results provide evidence for a novel P4-evoked Ca2+ entry pathway that is downregulated by PGRMC1.