Estudio de la matriz extracelular secretada en fibroblastos de pacientes de mucopolosacaridosis

Abstract

La matriz extracelular (MEC) es una sustancia secretada por las células presente en el espacio intercelular. Entre sus componentes se encuentras los glucosaminoglicanos (GAGs), cuya acumulación pueden causar las mucopolisacasidoris (MPS), una serie se síndromes causados por la deficiencia de la enzimas lisosomales que degradan GAGs específicos. La mucopolisacaridosis I (MPS I) resulta de la acumulación de dermatán y heparán sulfato, y su detección temprana es crucial para su tratamiento, y por tanto el desarrollo de nuevas metodologías es esencial. . Este estudio pretende proponer una nueva forma de detección de la MPS I mediante la contabilización del número de fibroblastos adheridos con fotomicroscopía, y el análisis de cantidad de proteínas de la MEC usando electroforesis de proteínas y el método Bradford. Estos estudios se realizarán a diferentes tiempos de generación de la MEC. Los resultados revelan una buena capacidad de la detección de la enfermedad a través de las fotografías de fibroblastos, con diferencias relevantes en el número de células adheridas entre pacientes y controles. Por otra parte, la electroforesis solo mostró una banda que corresponde a una muestra de paciente con 14 días de generación de MEC, lo que sugiere que este método no es factible. El método Bradford confirmó la presencia de proteínas, pero sin diferencias significativas entre controles y pacientes.

The extracellular matrix (ECM) is a substance secreted by cells in the intercellular space. Among its components are glycosaminoglycans (GAGs), the accumulation of which can cause mucopolysaccharidoses (MPS), a series of syndromes caused by deficiency of lysosomal enzymes that degrade specific GAGs. Mucopolysaccharidosis I (MPS I) results from the accumulation of dermatan and heparan sulfate, and its early detection is crucial for its treatment, and therefore the development of new methodologies is essential. This study aims to propose a new way of detecting MPS I by counting the number of adherent fibroblasts with photomicroscopy, and analyzing the amount of ECM proteins using protein electrophoresis and the Bradford method. These studies will be performed at different ECM generation times. The results reveal a good capacity of disease detection through fibroblast photographs, with relevant differences in the number of adherent cells between patients and controls. On the other hand, electrophoresis showed only one band corresponding to a patient sample with 14 days of ECM generation, suggesting that this method is not feasible. The Bradford method confirmed the presence of proteins, but without significant differences between controls and patients.