La influencia del estrés de manejo en la histofisiología del hipotálamo y la pineal de la oveja. Efecto de la melatonina

Abstract

Se ha diseñado un modelo de estrés inducido en la oveja, con cambios alternativos de ubicación y alimentación, en hembras ovinas en ancestro. Pretendemos analizar las modificaciones histofisiológicas que se presentan en el hipotálamo y la pineal bajo las condiciones de estrés, y evaluar el efecto anti-estrés de la melatonina. Para ello, hemos creado cuatro grupos experimentales:

1,- Que denominamos Control, donde los animales se encuentran en condiciones de bienestar.

2,- Animales bajo las condiciones de estrés.

3,- Efecto de la melatonina en condiciones de bienestar animal.

4,- Efecto anti-estrés de la melatonina.

Todos los supuestos experimentales se ejecutarán bajo las condiciones de fotoperiodos largos (inhibitorios) y cortos (estimulatorios).

Se realizaran Análisis Histológicos en el Hipotálamo: configuración histológica de los Núcleos Surpaquiasmáticos del hipotálamo, expresión mediante hibridación in situ y cualificación morfométrica del ARNm para el receptor de melatonina (MT1a) inmunodetección y cuantificación morfométrica de neurotrofinas hipotalámicas (Factor neurotrófico derivado del cerebro-BDNF- y Factor de crecimiento neuronal -NGF-) y proteínas de golpe de calor (HSP70 y 90); estudios de binding de 3H-dexametasona.

Análisis Histólogicos en la glándula pineal: inmunomarcaga e histomorfometría de Pinealocitos (Synapthophysin) y de fibras nerviosas (neuropeptido Y -NPY-); hibridación in situ para el ARNm de los B1 Adrenoreceptores de la membrana de los pinealocitos.

Finalmente se determinarán concentraciones plasmáticas y séricas de corticosterona y melatonina por radioinmunoensayo (RIA) y las concnetraciones de melatonina en hipotálamo y pineal mediante cromatrografía líquida de alta resolución (HPLC).