Nuevas estrategias analíticas para la determinación de pteridinas biomarcadoras en fluidos biológicos, mediante métodos separativos y quimiométricos

Abstract

El término "pteridina" se propuso para denominar a una serie de anillos pirazino [2,3-d] pirimidino, que se encuentran en un amplio rango de sistemas vivos y participan en funciones biológicas relevantes. Estos analitos de interés incluyen derivados pteridínicos (sustituyentes 2-amino-4-hidroxi) y lumazínicos (sustituyentes 2,4-dihidroxi).

Se propone un método que permite la determinación simultánea de pteridinas marcadoras y los cofactores BH4 y BH2, mediante un sistema cromatográfico acoplado con un fotorreactor post-columna, usando detección fotométrica de diodos y fluorimétrica de barrido rápido, en línea.

Se lleva a cabo un estudio comparativo para establecer el efecto que ejercen las condiciones de oxidación previas de las muestras de orina, sobre los resultados obtenidos en el análisis de once pteridinas. Se ha establecido un método cromatográfico usando detectores en serie para muestras de orina que han sido oxidadas previamente por dos métodos: usando medio básico con yodo/yoduro y neutro con permanganato de potasio.

Se utilizó un tratamiento quimiométrico de las señales de segundo orden intensidad de fluorescencia-longitud de onda de emisión-tiempo de retención, con objeto de establecer un método rápido para determinar cromatográficamente NEO, XAN, BIO ISO y PT, consideradas como las pteridinas marcadoras básicas. El algoritmo MCR-ALS permitió la determinación de dichas pteridinas, en muestras de orina, en presencia de interferencias de la matriz no modeladas.