STIM1 phosphorylation triggered by epidermal growth factor mediates cell migration

Abstract

STIM1 es un regulador clave de la entrada de calcio operada por almacén (SOCE), y por lo tanto un mediador de eventos celulares dependientes de la entrada de Ca 2+. Se ha descrito que la fosforilación de STIM1 en los sitios objetivo de ERK1/2 mejora la activación de STIM1 durante el vaciado intracelular de Ca 2+ desencadenado por la inhibición de la Ca 2+ -ATPasa sarco(endo)plasmática con thapsigargin. Sin embargo, no se conoce ninguna función fisiológica para esta fosforilación específica. El presente estudio examinó el papel de la fosforilación de STIM1 en la señalización celular desencadenada por el EGF. Utilizando una línea celular de adenocarcinoma de endometrio humano (células Ishikawa) se descubrió que el EGF o H-Ras(G12V), un mutante activo de H-Ras, desencadenaba la fosforilación de STIM1 en los residuos Ser575, Ser608 y Ser621, y este proceso era sensible al PD0325901, un inhibidor de ERK1/2. Tanto la activación de ERK1/2 como la fosforilación de STIM1 tuvieron lugar en ausencia de Ca 2+ extracelular, lo que indica que ambos eventos son pasos previos a la activación de la entrada de Ca 2+. Además, el EGF desencadenó la disociación de STIM1 de EB1 (un regulador de los extremos de los microtúbulos) de una manera similar a la reportada para la activación de STIM1 por el thapsigargin. La migración de las células de Ishikawa se vio afectada cuando la fosforilación de STIM1 fue dirigida por la mutación de Ser a Ala de los sitios objetivo de ERK1/2. Este efecto también se observó con el bloqueador del canal de Ca 2+ SKF96365. La mutación fosfomimética de STIM1 restauró la migración a niveles similares a los encontrados para STIM1 de tipo salvaje. Por último, el aumento de la expresión de vimentina y la relocalización de E-cadherina desencadenados por el EGF se inhibieron en gran medida al dirigir la fosforilación de STIM1, mientras que STIM1-S575E/S608E/S621E normalizó los perfiles de estos dos marcadores de EMT.