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http://hdl.handle.net/10662/15317
Title: | Técnica de sobreexpresión génica |
Authors: | Martínez Chacón, Guadalupe Fuentes Rodríguez, José Manuel Yakhine-Diop, Sokhna M. S. Rodríguez Arribas, Mario Paredes Barquero, Marta Alegre Cortés, Eva Canales Cortés, Saray Duque González, Gema Giménez Bejarano, Alberto Delgado Luceño, María Pura Uribe Carretero, Elisabet Niso Santano, Mireia González Polo, Rosa Ana |
Keywords: | Sobreexpresión génica;Enfermedades neurodegenerativas;Proteínas exógenas marcadas;Transfección química;Gene overexpression;Neurodegenerative diseases;Exogenously labelled proteins;Chemical transfection;Western bolt |
Issue Date: | 2021 |
Publisher: | Universidad de Extremadura, Servicio de Publicaciones |
Abstract: | Para la introducción de proteínas exógenas marcadas (plásmidos bacterianos en ocasiones marcados) se realiza una transfección, que consiste en la introducción de ADN o ARN de un virus o bacteriófago procariota en el interior celular. Después, se realiza una transfección química. Finalmente, se observan las células al microscopio de fluorescencia y si la transfección presenta una buena eficiencia. 24 horas más tarde, se realiza el tratamiento en medio completo, se fijan (placa de 24 o 96 pocillos) y se montan las lamelas (placa 24 pocillos) para su observación si se va a realizar la técnica de inmunofluorescencia o se lisan (placa 6 pocillos) si se va a realizar análisis de la sobreexpresión por Western blotting. For the introduction of tagged exogenous proteins (sometimes tagged bacterial plasmids), a transfection is performed, which involves the introduction of DNA or RNA from a prokaryotic virus or bacteriophage into the cell interior. This is followed by chemical transfection. Finally, the cells are observed under a fluorescence microscope to determine whether the transfection is efficient. 24 hours later, the cells are treated in complete medium, fixed (24- or 96-well plate) and lamellae are mounted (24-well plate) for observation if immunofluorescence is to be performed or lysed (6-well plate) if overexpression analysis by Western blotting is to be performed. |
URI: | http://hdl.handle.net/10662/15317 |
ISBN: | 978-84-09-30816-3 |
Appears in Collections: | DBYBM - Libros o capítulos de libros |
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